方法名稱:胞磷膽堿鈉-液相色譜法測定

　　應用:本方法采用液相色譜法測定胞磷膽堿鈉(C14h25n4Nao11p2 H2O)的含量。

　　該方法適用于胞磷膽堿鈉。

　　原理:將供試品制成水溶液，用液相色譜儀分離。用紫外吸收檢測器在276nm波長處檢測胞磷膽堿鈉的吸收值，計算其含量。

　　試劑:1.甲醇

　　2.磷酸緩沖液

　　3.四丁基磷酸銨溶液

　　儀器:1.工具

　　1.1液相色譜儀

　　1.2色譜柱

　　十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填料

　　1.3紫外線吸收檢測器

　　2.色譜條件

　　2.1流動相:磷酸鹽緩沖液甲醇= 95 5.

　　2.2檢測波長:276納米

　　2.3柱溫:室溫

　　樣品準備:1.磷酸緩沖液

　　將0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液和磷酸四丁基銨溶液等量混合。

　　2.四丁基磷酸銨溶液

　　取0.01摩爾/升的四丁基氫氧化銨溶液，用磷酸調節(jié)pH值至4.5.

　　3.稱量樣品。

　　準確稱取適量本品。

　　4.參考溶液的制備

　　準確稱取5'-胞苷適量，加水配成每1mL含0.25mg的溶液，取上述溶液適量，與胞磷膽堿鈉對照品等量混合。搖勻。

　　5.測試溶液的制備

　　將試樣溶于水中，制成每毫升含0.25毫克的溶液，搖勻。

　　注:“精確稱量”是指稱量應精確到所稱重量的千分之一。“精密測量”是指體積測量的準確度應滿足國家標準中體積移液器的準確度要求。

　　操作步驟:準確吸取上述對照溶液10 μ l和供試品溶液10μL于液相色譜儀中，用紫外吸收檢測器在波長276nm處測定胞磷膽堿鈉的吸收值，計算其含量。