三磷酸腺苷二鈉分析
2020-12-18
方法名稱
三磷酸腺苷二鈉原料總核苷酸的測定分光光度法
應用范圍
該方法使用分光光度法測定三磷酸腺苷二鈉散裝藥物中總核苷酸的含量。
本方法適用于三磷酸腺苷二鈉原料 藥。
方法原理
向待測試品中加入0.1 mol / L磷酸緩沖液制成供試液。置紫外可見分光光度計,在259nm波長處測量吸光度,并計算其含量。
試劑
磷酸緩沖液(0.1mol/L)
儀器設備
紫外可見分光光度計
試樣制備
1.磷酸緩沖液(0.1mol/L)
取磷酸氫二鈉35.8g,加水至1000mL。無水磷酸二氫鉀13.6g,加水至1000mL,二液互調(diào)pH值至7.0.
2. 供試品溶液的制備
精密稱取供試品適量,加入0.1 mol / L磷酸鹽緩沖液溶解,制成每1 mL含20ug的溶液,即得待測溶液。
注:“精密稱取”是指稱取量應精確到稱量的千分之一,精密量取是指測量體積的準確度應符合國家標準中移液器的精度要求。
操作步驟
取供試品溶液照紫外分光光度法,于波長259nm處測定吸收度。按C10H14N5Na2O13P3的吸收系數(shù)(E1%1cm)為279計算,即得。
注:分光光度法應以配制供試品的同批溶劑為對照,采用1cm的石英吸收池,以吸收度最大的波長作為測定波長,一般供試品的吸收度讀數(shù),以在0.3-0.7之間的誤差較小,儀器的狹縫波帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度。否則測得的吸收度偏低,狹縫寬度的選擇,應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準,由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收,因此測定供試品的吸收度后應減去空白讀數(shù),再計算含量。
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