谷胱甘肽含量測定的常見原理

　　GSH是細胞內(nèi)最主要的抗氧化巰基物質，在抗氧化、蛋白質巰基保護和氨基酸跨膜運輸?shù)戎芯哂兄匾饔?，還原型與氧化型比值(GSH/GSSG)是細胞氧化還原狀態(tài)的主要動態(tài)指標。因此，測定細胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態(tài)，也是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的主要指標之一。

　　1、谷胱甘肽還原型測定原理：

　　谷胱甘肽能和 5.5’二 硫代-雙-(2-密斑油甲酸)反應產(chǎn)生 2-硝基-5-苯硫醇甲酸和谷胱甘肽二 硫化物(GSSG)，2-硝基-5-苯硫醇甲酸為黃色產(chǎn)物，在波長412nm處具有最大光吸收，其吸光度與GSH含量成正比。

　　2、氧化型谷胱甘肽測定原理：

　　氧化型谷胱甘肽(GSSG)是谷胱甘肽(GSH)的氧化形式，又稱為二 硫代谷胱甘肽，是兩分子的谷胱甘肽氧化而成，GSSG會被谷胱甘肽還原酶還原成GSH，因此機體中大多數(shù)是以還原型式存在。

　　通過 2-乙烯氮苯抑制樣品中原有的還原型谷胱甘肽，然后利用谷胱甘肽還原酶將GSSG 還原為GSH。再利用谷胱甘肽能和 5.5’-二 硫代-雙-(2-密斑油甲酸)(5.5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB)反應產(chǎn)生 2-硝基-5-苯硫醇甲酸。2-硝基-5-苯硫醇甲酸在波長 412nm 處具有最大光吸收的特點，借此測定氧化型谷胱甘肽的含量。