胞磷膽堿鈉分析
2021-09-09
方法名稱:胞磷膽堿鈉的測(cè)定——液相色譜法
應(yīng)用范圍:本方法采用液相色譜法測(cè)定胞磷膽堿鈉(C14H25N4NaO11P2·H2O)的含量。
該方法適用于胞磷膽堿鈉。
方法原理:將供試品制成水溶液,進(jìn)入液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測(cè)器在276nm波長(zhǎng)處檢測(cè)胞磷膽堿鈉吸收值,計(jì)算其含量。
試劑:1.甲醇
2. 磷酸鹽緩沖液
3. 四丁基磷酸銨溶液
儀器:1.儀器
1.1 液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠 凝膠作為填充
1.3 紫外吸收檢測(cè)器
2.色譜條件
2.1 流動(dòng)相:磷酸鹽緩沖液甲醇 = 95 5.
2.2 檢測(cè)波長(zhǎng):276nm
2.3 柱溫:室溫
樣品制備:1.磷酸鹽緩沖液
0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液和磷酸四丁銨溶液等量混合。
2.磷酸四丁銨溶液
取0.01mol/L氫氧化四丁銨溶液,用磷酸調(diào)pH至4.5.
3.稱取供試品
精確稱取適量本品。
4.對(duì)照品溶液的制備
準(zhǔn)確稱取適量的5'-胞苷酸,加水配成每1mL含0.25mg的溶液,取上述溶液適量,混勻與胞磷膽堿鈉參比物質(zhì)相同的量。 搖勻即可。
5. 供試品溶液的制備
將供試品溶于水后,配成每1mL含0.25mg的溶液,搖勻,即得。
注:“精密稱量”是指稱量應(yīng)精確到所取重量的千分之一。“精密測(cè)量”是指測(cè)量體積的準(zhǔn)確度應(yīng)滿足國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中體積移液器的準(zhǔn)確度要求。
操作步驟:分別精確吸取上述對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μL到液相色譜儀中,用紫外吸收檢測(cè)器在276nm波長(zhǎng)處測(cè)定胞磷膽堿鈉的吸收值,計(jì)算其含量。
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