胞磷膽堿鈉的分析
2022-04-07
方法名稱:胞磷膽堿鈉-液相色譜法測定
應用范圍:本方法采用液相色譜法測定胞磷膽堿鈉(C14h25n4Nao11p2 H2O)的含量。
該方法適用于胞磷膽堿鈉。
原理:將供試品制成水溶液,用液相色譜儀分離。用紫外吸收檢測器在276nm波長處檢測胞磷膽堿鈉的吸收值,計算其含量。
試劑:1.甲醇
2.磷酸緩沖液
3.四丁基磷酸銨溶液
儀器:1.儀器
1.1液相色譜儀
1.2色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠作為填料
1.3紫外線吸收檢測器
2.色譜條件
2.1流動相:磷酸鹽緩沖液甲醇= 95 5.
2.2檢測波長:276納米
2.3柱溫:室溫
樣品準備:1.磷酸緩沖液
將0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液和磷酸四丁基銨溶液等量混合。
2.四丁基磷酸銨溶液
取0.01摩爾/升的四丁基氫氧化銨溶液,用磷酸調(diào)節(jié)pH值至4.5.
3.稱量樣品。
準確稱取適量本品。
4.參考溶液的制備
準確稱取5'-胞苷適量,加水配成每1mL含0.25mg的溶液,取上述溶液適量,與胞磷膽堿鈉對照品等量混合。搖勻。
5.測試溶液的制備
將試樣溶于水中,制成每毫升含0.25毫克的溶液,搖勻。
注:“精確稱量”是指稱量應精確到所稱重量的千分之一?!熬軠y量”是指體積測量的準確度應滿足國家標準中體積移液器的準確度要求。
操作步驟:準確吸取上述對照溶液10 μ l和供試品溶液10μL于液相色譜儀中,用紫外吸收檢測器在波長276nm處測定胞磷膽堿鈉的吸收值,計算其含量。
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